Особенности диагностики злокачественных новообразований у детей

ГОУ ВПО Кировская Государственная

медицинская академия

Кафедра онкологии

 

Особенности диагностики злокачественных новообразований у детей

 

                           Выполнили: Ардашева О.В.,                                                                             Бухарова М.В., Ивкова Е.Е., Мамонтова Е.В.студенты педиатрического    факультета, 633 группы

 

Киров,2014 г.

 

• Детская онкология - молодая наука. Но, несмотря на свою молодость, педиатрическая онкология демонстрирует значительные научные достижения.

• У детей, как и у взрослых, злокачественные опухоли могут появиться в любом органе. Однако в организме детей развиваются только определенные типы опухолей. Первое место по частоте встречаемости занимают лейкозы (белокровие, рак крови).

• Диагностика злокачественных опухолей у детей имеет свои особенности, которые зависят от возраста маленького пациента. У малышей в возрасте 2-3 лет весьма трудно выяснить ощущения ребенка, жалобы, его самочувствие. В таких случаях анамнез, или историю заболевания, необходимо выяснять у родителей ребенка, его опекунов или взрослых людей, ухаживающих за ним.

• В таких случаях анамнез, или историю заболевания, необходимо выяснять у родителей ребенка, его опекунов или взрослых людей, ухаживающих за ним

• Сведения, полученные от взрослых, к сожалению, все равно не равноценны сведениям, которые мог бы дать сам больной. Хотя во многих случаях единственным способом узнать о самочувствии ребенка является наблюдение за его поведением, его внешним видом, самочувствием. В связи с этим объективное обследование ребенка занимает большое место в диагностике детской онкологии.

• Современные методы диагностики и лечения позволяют своевременно обнаружить злокачественное новообразование и излечить более половины детей.

• Проблема лечения детей со злокачественными опухолями сегодня очень актуальна и направлена не только на спасение их жизни, но и на то, чтобы помочь детям прожить полноценную жизнь.

 

       Успех лечения злокачественной опухоли во многом зависит от точной диагностики, основы которой составляют определение природы злокачественного процесса(выявляемой морфологически, иммунологически и генетически) и установление степени распространенности процесса, т.е стадии заболевания.

• Уже при первом контакте с больным часто удается заподозрить природу патологического процесса и определить алгоритм детального обследования.
• При сборе анамнеза часто сразу можно выделить главные жалобы и ведущие симптомы, которые могут нацелить на определенное заболевание.

Методы исследования в детской онкологии

УЗИ брюшной полости и забрюшинного пространства

 

• Безвредный неинвазивный метод, который может дать достаточно информации об источнике опухоли, вовлечении лимфатических узлов и инвазии крупных сосудов.
• Появление в клинической практике цветных допплер ультразвуковых аппаратов сделало этот метод высокоинформативным, особенно при выявлении инвазии сосудов при опухоли Вильмса и гепатобластоме.

• УЗИ способно выявить метастазы в печени, поражение печени при грибковой инфекции.
• УЗИ яичек может подтвердить клиническое предположение о поражении при лимфомах и лейкемиях. Посредством УЗИ можно определить природу некоторых мягкотканых образований, таких как доброкачественные кисты или варикоцеле.

Рентгенография костей

 

• Высокоинформативный метод дифференциальной диагностики опухолей костей. Должны быть оценены характер деструкции костной ткани, степень распространения внутри кости, реакция надкостницы, выход процесса в мягкие ткани.

Радиоизотопные исследования

 

• Остеосцинтиграфия с Тс 99 – информативный метод при обследовании больных с опухолями, потенциально метастазирующими в кости. Поэтому этот метод обязателен при первичном обследовании больных с нейробластомой, рабдомиосаркомой, саркомой Юинга, остеосаркомой. Остеосцинтиграфия более чувствительный метод, чем рентенография, она выявляет злокачественное поражение костей на 4- 6 мес раньше, чем рентген.

• Электронная микроскопия- дополнительный к световой микроскопии метод для уточнения некоторых диагнозов.
• Этапы обработки исследуемого материала имеют некоторые особенности:

Иммунофлюоресцентный и иммуноцитохимический анализ.

 

• Иммунофлюоресцентное маркирование клеток в пробирках для микротитрования.
• В прямых методах ИФлА используют специфические к клеточным антигенам антитела, конъюгированные с флюоресцентной меткой и маркирование клеток производят как одноэтапную реакцию.

• В непрямых методах ИФлА в качестве первых антител используют немеченые антитела к клеточным антигенам, а в качестве вторых – меченые флюорохромом антитела к специфическим иммуноглобулинам (первым антителам).
• Маркирование клеток производят в два этапа. Вторые антитела служат для выявления связанных с клеткой первых антител.
• Непрямые методы обычно чувствительнее прямых.

Иммуноцитохимический анализ цитологических препаратов.

 

• Основанные на реакции антиген-антитело методы микроскопического выявления и идентификации молекулярных компонентов клеток называют иммуноцитохимическими.
• В качестве реагентов для выявления клеточных антигенов в большинстве случаев используют специфические МКАТ(моноклональные антитела), которые после связывания с антигеном устанавливают прямым или непрямым методом по метке. Меткой служат конъюгированные с антителами ферменты или флюорохромы.

• При постановке иммуноцитохимического метода требуется прежде всего так фиксировать исследуемый клеточный материал, чтобы в клетках сохранялась нативность выявляемых антигенов.
• Иммуноферментное маркирование можно осуществлять при помощи комплекса щелочная фосфатаза- антитела к щелочной фосфатазе.(ЩФ-АЩФ). Если ЩФ непосредственно присоединить к антителам, то реакция будет происходить там, где меченые ферментом антитела связались с антигеном.

• При микроскопировании окрашенных препаратов на фоне обычной цитологической картины можно идентифицировать продукт ферментативной реакции. Конечный продукт ферментативной реакции имеет хорошо заметный красный цвет.

Двойное маркирование клеток.

 

• Цель двойного маркирования -выявление двух различных антигенов на одной клетке. Для его осуществления можно воспользоваться 2 образцами флюорохромированнных первых антител, например  2  образцами мышиных моноклональных антител разного изотипа, которые затем выявляются вторыми класс и субкласс специфическими антителами к мышиным иммуноглобулинам, конъюгированными с разными флюорохромами.

• Поочередно используя комплекты светофильтров для ФИТЦ(изотиоцианат флуоресцеина) и ТРИТЦ(изотиоцианат тетраметилродамина) можно определить маркирована ли данная клетка антителами одной или двух специфичностей.

 

Иммуногистохимия

 

• - метод выявления и определения точной локализации того или иного клеточного или тканевого компонента(антигена) in situ с помощью иммунологических и гистохимических реакций. Основой ИГХ является реакция антигена и антитела.

• В качестве антигена может выступать структурные белки клеток, рецепторы гормонов, онкопротеины и т.д. После иммунизации лабораторного животного антигеном его В-лимфоциты начинают синтез антител. При встрече антигена с антителом происходит их связывание. Задача ИГХ на этом этапе- сделать продукт антиген-антитело видимым для глаза. Для этого используют метки разного типа. В качестве ферментной метки используют ЩФ, глюкозооксидазу

 

Определение клональности

 

• Существует надежный тест определения клональности В-лимфоцитов и плазматических клеток.

Окрашивание стромальных тканевых компонентов.

 

• Имеется ряд антител, которые окрашивают основные структурные белки базальных мембран коллагеном 4 типа позволяет более достоверно диагностировать начальные признаки инвазивного роста.

• Эти же антитела позволяют оценить соотношение стромы и опухолевых клеток. Антитела к фактору 8 окрашивают эндотелий сосудов и могут быть использованы для оценки степени васкуляризации и сосудистой инвазии в опухолях. Они также окрашивают все сосудистые опухоли.

Иммунофенотипирование опухолей

 

• Наиболее распространено иммунофенотипирование лимфом, при этом фенотип лимфопролиферативных заболеваний обычно выражен как перечень антигенов по классификации СД, которые обнаружены в конкретном случае.
• Иммунофенотипический дифференциальный диагноз двух близких по морфологии вариантов лимфом- лимфогранулематоза и анапластической крупноклеточной лимфомы

Цитогенетика

 

• Изменение хромосом у больных лейкозами.
• - на примере острого нелимфобластного лейкоза:

• - на примере острого лимфобластного лейкоза:

Молекулярная биология

Принципы основных лабораторных молекулярно-биологических методик.

 

         Цитогенетический анализ.

• - используется для выявления крупных хромосомных аномалий, затрагивающих обширные области генома.
• В онкологии ЦГА может быть методом выбора для диагностики хромосомных транслокаций при гемопоэтических новообразованиях.