Анализ бенздизепиновых препаратов

МИНИСТЕРСТВО  ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ, МОЛОДЕЖИ И  СПОРТА УКРАИНЫ

ОДЕССКИЙ НАЦИОНАЛЬНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ ИМ. И.И.МЕЧНИКОВА

ХИМИЧЕСКИЙ  ФАКУЛЬТЕТ

 

 

 

 

 

Анализ бенздиазепиновых препаратов

 

 

 

 

 

Автор:

Вороненко Евгений  Валерьевичь,

студент IV курса химического  факультета

       

 

 

 

 

Одесса 2013

Введение            3

1. НЕКОТОРЫЕ ОСОБЕННОСТИ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОГО АНАЛИЗА БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ    4

2. МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ И СТАНДАРТИЗАЦИИ НЕКОТОРЫХ БЕНЗДИАЗЕПИНОВЫХ ПРЕПАРАТОВ      6

2.1 Анализ гидазепама и его лекарственных форм    6

2.2 Анализ диазепама и его лекарственных форм           11

2.3 Анализ оксазепама и его лекарственных форм           14

2.4 Анализ нитразепама и его лекарственных форм          16

Литература                          19

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Введение

Охрана здоровья человека, медицинская  помощь практически здоровым, но находящимся  в состоянии нервного переутомления, людям с целью предупреждения нервно-психических расстройств и других заболеваний ЦНС — благородная и важная задача. В нашей стране ее решению необходимо уделить большее внимание. Борьба с болезнями нервной системы определена как одна из важнейших медикобиологических проблем. Исследования в этой области направлены на создание все более эффективных и безопасных психофармакологических препаратов. В нашей стране работы, посвященные созданию и изучению лекарственных средств этого типа достаточно успешны с момента зарождения новой области медицинской науки — психофармакологии.

Пятидесятые годы XX века принято считать  началом эры психофармакологии. Именно в эти годы появились психотропные медикаменты, призванные революционизировать лечение психически больных.

Наиболее употребимыми в медицинской практике препаратами являются транквилизаторы (ныне именуются нейролептиками). Транквилизаторы первого поколения с начала 60-х годов начали вытесняться более эффективными препаратами ряда 1,4-бенздиазепинов. В настоящее время хлордиазепоксид диазепам, оксазепам, нитразепам, клоназепам, лоразепам, феназепам и другие производные 1,4-бенздиазеппна занимают ведущее положение в арсенале транквилизирующих средств. Более того, за сравнительно короткий срок препараты 1,4-бенздиазепинового ряда во многих странах мира стали одними из самых распространенных лекарственных средств. По числу выписываемых на них рецептов 1,4-бенздназепииовые транквилизаторы занимают сейчас второе место после аспирина среди всех лекарственных препаратов.

Чистоту бенздиазепиновых препаратов, как и любых других, необходимо контролировать на многих этапах производства: синтез, выделение чистого бенздиазепина, перевод в лекарственную форму. На каждой из этих стадий могут происходить различные побочные процессы загрязняющие продукт и следовательно надо знать на сколько данный препарат или действующее вещество соответствуют стандартам.

Цель данной работы осветить некоторые  подходы и способы контроля качества и стандартизации некоторых бенздиазепиновых препаратов.

 

1. НЕКОТОРЫЕ ОСОБЕННОСТИ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОГО АНАЛИЗА БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ

Стандартизацией и контролем  качества различных препаратов занимается фармацевтический анализ. Это наука о химической характеристике и измерении биологически активных веществ на всех этапах производства: от контроля сырья до оценки качества полученного лекарственного вещества, изучения его стабильности, установления сроков годности и стандартизации готовой лекарственной формы. Фармацевтический анализ имеет свои специфические особенности, отличающие его от других видов анализа. Эти особенности заключаются в том, что анализу подвергают вещества различной химйческой природы: неорганические, элементорганические, радиоактивные и органические соединения от простых алифатических до сложных природных биологически активных веществ. Чрезвычайно широк диапазон концентраций анализируемых веществ. Объектами фармацевтического анализа являются не только индивидуальные лекарственные вещества, но и смеси, содержащие различное число компонентов. Количество лекарственных средств с каждым годом увеличивается. Это вызывает необходимость разработки новых способов анализа.

Способы фармацевтического анализа  нуждаются в систематическом  совершенствовании в связи с  непрерывным повышением требований к качеству лекарственных средств, причем растут требования, как к степени чистоты лекарственных веществ, так и к количественному содержанию. Поэтому необходимо широкое использование не только химических, но и более чувствительных физико-химических методов для оценки качества лекарств.

К фармацевтическому анализу предъявляют  высокие требования. Он должен быть достаточно специфичен и чувствителен, точен по отношению к нормативам, выполняться в короткие промежутки времени с использованием минимальных количеств испытуемых лекарственных препаратов и реактивов.

Составной частью фармацевтического  анализа является фармакопейный  анализ. Он представляет собой совокупность способов исследования лекарственных препаратов и лекарственных форм, изложенных в Государственной фармакопее (ГФ) или другой нормативно-технической документации. На основании результатов, полученных при выполнении фармакопейного анализа, делается заключение о соответствии лекарственного средства требованиям ГФ или другой нормативно-технической документации. При отклонении от этих требований лекарство к применению не допускают.

Выполнение фармакопейного анализа  позволяет установить подлинность лекарственного средства, его чистоту, определить количественное содержание фармакологически активного вещества или ингредиентов, входящих в состав лекарственной формы. Несмотря на то, что каждый из этих этапов имеет свою конкретную цель, их нельзя рассматривать изолированно. Они взаимосвязаны и взаимно  дополняют друг друга. Так, например, температура плавления, растворимость, рН среды водного раствора и т.д. являются критериями как подлинности, так и чистоты лекарственного вещества.

 

2. МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ И СТАНДАРТИЗАЦИИ НЕКОТОРЫХ БЕНЗДИАЗЕПИНОВЫХ ПРЕПАРАТОВ

2.1 Анализ гидазепама и его лекарственных форм

Гидазепам

Гидазепам (1-гидразинокарбонилметил-7-бром-5-фенил-1,2-дигидро-3Н-1,4-бенздиазепин-2-он) – лекарственное средство, транквилизатор, оказывающий анксиолитическое и противосудорожное действие. Отличается от других бензодиазепиновых (и небензодиазепиновых) транквилизаторов наличием активирующего эффекта, а снотворный и мышечнорасслабляющий эффекты выражены слабо.

Методы анализа гидазепама. Методы анализа разрабатывались в соответствии с требованиями ГФ и учетом данных по анализу производных 1,4-бенздиазепина. Для групповой идентификации гидазепама предложена флуоресцентная реакция с хлорной кислотой в среде спирта и хлороформа (1:1) предложенная для феназепама. Специфичность реакции проверена на феназепаме, нитразепаме, нозепаме, диазепаме, медазепаме и хлордиазепоксиде.

От других производных 1,4-бенздиазелина  гидазепам отличается гидразинокарбонилметильной группой, за счет которой при его гидролизе выделяется гидразин. Поэтому предложено гидазепам подвергать гидролизу, а по гидразину определять реакциями образования серебряного зеркала, оксида меди(I) и соответствующего азина при конденсации с п-диметиламинобензальдегидом (ПДА). Последняя реакция наиболее специфична для гидазепама.

Гидазепам не вступает в реакцию  с ПДА без предварительного гидролиза, что использовано при разработке методики определения примесей

гидразина в препарате, с помощью  которой можно обнаружить примесь гидразина в препарате в количестве 0,1 % и выше. Другие методы анализа (неводное титрование, ТСХ) менее чувствительны.

Для доказательства наличия брома  в молекуле гидазепама последний  сжигали в кислороде, свободный бром улавливали раствором щелочи, а ион брома определяли по методике из ГФ.

а.) сжигание гидазепама:

2С₁₇H₁₅BrN₄O₂ + 55O₂ = 34CO₂ + 30H₂O + 6NO₂ + Br₂ ()

б.) улавливание выделившегося  брома раствором щелочи:

H₂O + Br₂ = HBr + HBrO

3HBrO = 2HBr + HBrO₃

2KOH + HBr + HBrO₃ = KBr + KBrO₃ + 2H₂O

Специфическими примесями в  гидазепаме могут быть промежуточные  продукты синтеза (гидразин, 7-бром-5-фенил-1,2-дигидро-ЗН-1,4-бенздиазепин-2-он, 1-(метоксикарбонил)метил-7-бром-5-фе-нил-1,2-дигидро-ЗН-1,4-бенздиазепин-2-он) и продукты разложения (5-бром-2-аминобензофенон, 5-бром-2-карбоксиметиламинобензофенон). Для приготовления искусственных смесей гидазепама и примесей из десяти систем растворителей выбрана оптимальная: метанол — ацетон — бензол (2 : 15 : 25). Величины R_f гидазепама 0,41; 1 — 0,49; 4 — 0,64; 2 — 0,67; 3 — 0,74 при проведении анализа на пластинках Силуфол УФ-254. Растворителем гидазепама служил ацетон, так как в нем растворяются и все перечисленные примеси.

 В качестве проявителей предложены УФ-свет с длиной волнщ 254 нм и спиртовый раствор ПДА. Чувствительность обнаружения с помощью УФ-света для гидазепама, 1 и 4 равна 0,2 мкг, а для 3 и 2 — примерно 0,4 мкг. При детектировании ПДА чувствительность для препаратов 3 и 2 составляет 0,1 мкг, поэтому рекомендуется применять одновременно два реагента: просматривание хроматограмм в УФ-свете сочетать с последующей обработкой пластинки спиртовым раствором ПДА и выдерживанием ее при 130 °С в течение 20 мин.

В настоящее время в фармации все чаще используется метод высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ), в частности в контроле чистоты и стабильности лекарственных веществ и лекарственных форм. Наиболее благоприятными для хроматографирования производных 1,4-бенздйазепина являются условия обращенно-фазового процесса, что связано с высокой полярностью указанных соединений.

Гидазепам — слабое основание, поэтому  для него, как и для большинства  производных 1,4-бенздиазепина, для установления количественного содержания пригоден метод неводного титрования; оптимальной средой является смесь ледяной уксусной кислоты и уксусного ангидрида (25 : 10), титрант — 0,1 н. хлорная кислота, индикатор — кристаллический фиолетовый. Появление зеленой окраски индикатора совпадает со скачком потенциала при потенциометрическом титровании.

Методы контроля качества таблеток гидазепама по 0,02 и 0,05 г.  Контроль качества, таблеток гидазепама проводился с учетом требований в отношении описания внешнего вида, определения распадаемости, средней массы таблеток, отклонений от средней массы и количественного содержания гидазепама в одной таблетке. Подлинность гидазепама в таблетках оценивалась по химическим реакциям, применяемым для идентификации субстанции гидазепама. Но для проведения этих реакций гидазепам необходимо извлекать из таблеток спиртом (в случае проведения реакции образования серебряного зеркала) и хлороформом (для флуоресцентной реакции). Кроме того, идентифицировать гидазепам в таблетках можно с помощью ТСХ-анализа в присутствии свидетеля гидазепама, который используется для нахождения органических примесей и гидазепаме-субстанции.

Примеси в таблетках обнаруживают методом ТСХ. Гидазепам и примеси из таблеток извлекают ацетоном, и ацетоновые вытяжки подвергают ТСХ-анализу. Примесь гидразина в таблетках предложено определять по методике, разработанной для индентификации субстанции гидазепама, для чего гидразин из таблеток извлекали спиртом.

Из-за малой дозировки гидазепама в таблетках не представляется возможным применить методику неводного титрования для количественного анализа препарата. В таких случаях наиболее эффективен спектрофотометрический метод для соединений, способных поглощать в УФ-области. Наибольшее удельное поглощение у гидазепама в воде и спирте при 230 нм (~860). В воде гидазепам очень плохо растворяется, поэтому предложено извлекать его из таблеток спиртом, а спиртовые вытяжки доводить водой до концентрации 0,0005 %. Экспериментально установлено, что основной закон светопоглощения для гидазепама соблюдается от 1 до 14 мкг/мл. Методика проверена на модельных смесях гидазепама и плацебо. Показано, что плацебо не поглощает, а ошибка определения не        превышает ±1 %.

2.2 Анализ диазепама и его лекарственных форм

 

Диазепам

Брутто формула: С₁₀Н₁₃СlN₂O

Диазепам содержит не менее 99.0 % и  не более 101.0 % 7-хлор-1-метил-5фенил-2,3-дигидро-1Н-1,4-бенздиазепин-2-она, в перерасчете на сухое вещество.

Свойства

Описание: кристаллический  порошок белого или почти белого цвета.

Растворимость: очень  мало растворим в воде, растворим  в 96 % спирте.

Идентификация

1. Температура плавления от 131 °С до 135 °С

2. Растворы готовят в защищенном от яркого света месте и измеряют оптическое поглощение растворов сразу после приготовления.

25 мг субстанции растворяют  в метанольном растворе серной кислоты (5 г/л) и доводят раствор до метки тем же растворителем до 250.0 мл (раствор А). 5.0 мл раствора А доводят метанольным раствором серной кислоты (5 г/л) до 100.0 мл. Ультрафиолетовый спектр поглощения полученного раствора в области от 230 нм до 330 нм должен иметь два максимума с длинами волн 242 нм и 285 нм. Удельное светопоглощение при 242 нм должен быть приблизительно 1020.

25 мл раствора А доводят метанольным раствором серной кислоты (5 г/л) до 100.0 мл. Ультрафиолетовый спектр поглощения полученного раствора в диапазоне 325 нм и 400 нм  должен иметь максимум при длине волны 366 нм. Удельное поглощение в максимуме должен быть от 140 до 155.

3. 10 мг субстанции растворяют в 3 мл серной кислоты. Раствор при освещении УФ-светом проявляет зелено-желтую флуоресценцию.