Автор работы: Пользователь скрыл имя, 19 Мая 2013 в 18:26, курсовая работа
Назначение обоих испытаний необходимо для характеристики чистоты образца.
Для валидации количественных и предельных испытаний необходимо размещение валидационной характеристики.
Количественное определение предназначено для определения количества анализируемого вещества в образце.
Глава I. Обзор литературы…………………………………………….3
§1.1. Введение…………………………………………………………..…3
§1.2. Общая характеристика и свойства рибоксина и производных 6,9-замещённых пурина………………………….…………………………………4
§1.3. Получение рибоксина и производных 6,9-замещённых пурина …………………………………………………………………………………….6
§1.4. Качественный анализ рибоксина и производных 6,9-замещённых пурина ……………………………………………………………………………6
§1.5. Методы количественного анализа рибоксина и производных 6,9-замещённых пурина …………………………………………………………….8
§1.6.Фармакологические свойства, применение, форма выпуска и условия хранения рибоксина и производных 6,9-замещённых пурина ………….………………………………………………………………………..10
Глава II. Экспериментальная часть. Валидационная оценка методики качественного и количественного определения рибоксина в таблетках (0,2 г.)……………………………………………………………….13
§2.1. Определение специфичности методики качественного анализа рибоксина в таблетках…………………………………………………………13
§2.2.Определение линейности рибоксина в таблетках……………………………………………………………………….16
§2.3.Определение прецизионности рибоксина в таблетках……………………………………………………………………….19
§2.4.Определение правильности рибоксина в таблетках…………………………………………………………………………23
Список литературы………………………………………………………28
Растворы готовили по методике:
Приготовить раствор А2 модельной смеси(методику смотреть ниже). Растворы Б1, Б2, Б3.В три мерные колбы вместимостью 100 мл помещают по 0,5 мл раствора А2 и доводят до метки.
Методика приготовления
Растворы Б4, Б5, Б6. В три мерные колбы, вместимостью 100 мл помещают по 1,0 мл раствора А2 и доводят водой до метки.
Раствор Б7, Б8, Б9. В три мерные колбы, вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл раствора А2 и доводят водой до метки.
Измеряют оптическую плотность из 9ти приготовленных растворов на спектрофотометре при длине волны 249 нм в кювете, толщиной слоя 10 мм.
Параллельно измеряют оптическую плотность раствора СО рибоксина.
Приготовление раствор СО рибоксина.
Точную навеску рибоксина ( 0,1000г) помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в воде , доводят водой до метки и перемешивают( раствор А).
В мерную колбу, вместимостью 100 мл вносят 1,0 мл раствора А и доводят водой до метки.( раствор Б).
1 мл раствора Б содержит 0,00001 г СО рибоксина.
Значения оптической плотности отражены в таблице 6.
Далее рассчитывают количественное содержание анализируемого вещества по формуле:
Полученные результаты приводят в таблице №6.
Таблица 6.Результаты проведения прецизионности спектрофотометрическим методом.
Аликвота р-ра А2 (Va) |
Оптическая плотность |
Найдено,г |
(хi -x) |
(xi - x)2 |
Метрологические характеристики | |||
0,5 |
0,237 |
0,204 |
0,0084 |
0,00007056 |
х=0,1956 SD=0,007887 RSD=4,032 | |||
0,5 |
0,239 |
0,206 |
0,0104 |
0,0001081 | ||||
0,5 |
0,240 |
0,206 |
0,0104 |
0,0001081 | ||||
1,0 |
0,443 |
0,191 |
-0,0046 |
0,00002116 | ||||
1,0 |
0,447 |
0,193 |
0,0026 |
0,0000676 | ||||
1,0 |
0,440 |
0,190 |
-0,0056 |
0,00003136 | ||||
2,0 |
0,879 |
0,1894 |
0,0062 |
0,00003844 | ||||
2,0 |
0,883 |
0,190 |
-0,0056 |
0,00003136 | ||||
2,0 |
0,889 |
0,191 |
-0,0046 |
0,00002116 | ||||
x=0,1956 |
Σ=0,00049796 | |||||||
Для оценки прецизионности используют значение стандартное отклонения(SD), которое рассчитывают по формуле:
Также рассчитывают значение относительного стандартного отклонения :
В фармацевтическом анализе для нормирования значений прецизионности наиболее оптимальным можно считать рекомендации американской ассоциации аналитической химии, в которой приводится данные оценки сходимости (воспроизводимости), как функции аналитической концентраций, которые приведены в таблице 7.
Таблица 7.Данные оценки воспроизводимости.
Содержание анализируемого компонента в образце, % |
Относительное стандартное отклонение (RSD) |
100 |
1,3 |
10 |
2,8 |
1 |
2,7 |
0,1 |
3,7 |
0,01 |
5,3 |
0,001 |
7,3 |
0,0001 |
11,0 |
0,00001 |
15,0 |
0,000001 |
21,0 |
0,0000001 |
30,0 |
Заключение: Так как рассчитанное значение RSD не больше приведённого в таблице, методика соответствует требованиям валидации по показателю прецизионность.
§2.4.Определение правильности рибоксина в таблетках
Правильностью аналитической методики
называется степень близости экспериментальных
результатов к истинному
Главным фактором определяющим правильность является значение систематической погрешности.
Для оценки правильности методики количественного определения применены следующие подходы:
а) применение аналитической методики к образцу с известной степенью чистоты ( СО);
б) сравнение результатов анализа, полученных с использованием валидируемой методики и арбитражного метода, правильность и прецизионность которого известны;
с) заключение о правильности можно сделать применяя метод добавок (стандартного образца)
Заключение о правильности методики можно сделать после того, как установлены специфичность, линейность и прецизионность.
Согласно рекомендациям
Для тестирования методики на правильность
готовили модельные смеси с различным
точным содержанием каждого из компонентов,
включая вспомогательные
Модельные смеси и анализируемые
растворы готовили по методикам. Методика
приготовления модельных
Готовили три раствора модельных смесей.
Раствор А1: Точную навеску модельной смеси (0,24 г) помещают в мерную колбу 200 мл, добавляют 100 мл воды, взбалтывают 15 минут и доводят водой до метки. Раствор перемешивают и фильтруют.
Раствор А2. Точную навеску модельной смеси (0,27г) помещают в мерную колбу 200 мл, добавляют 100 мл воды, взбалтывают 15 минут и доводят водой до метки. Раствор перемешивают и фильтруют.
Раствор А3.Точную навеску модельной смеси (0,3г) помещают в мерную колбу 200 мл, добавляют 100 мл воды, взбалтывают 15 минут и доводят водой до метки. Раствор перемешивают и фильтруют.
Измеряют оптическую плотность каждого из 9ти приготовленных растворов на спектрофотометре при длине волны 249 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм.
Параллельно измеряют оптическую плотность
раствора СО рибоксина (методика приготовления
приведена в разделе «
Полученные значения оптической плотности указаны в таблице 9.
Чтобы узнать количественное содержание
анализируемого вещества (Ха), необходимо
воспользоваться следующей
Значения содержания анализируемого вещества (Ха) приведены также в таблице 9.
Для оценки полученных результатов наиболее наглядным критерием служит открываемость (R), которая вычисляется по формуле:
Значения открываемости и статистическую обработку полученных значений (R) приведены ниже в таблице 8. Оценка открываемости в зависимости от концентрации активного компонента в анализируемом образце указана в таблице 10.
Таблица 8.
R, % |
Ri - R |
(Ri – R)2 |
|
100,5 |
2,03 |
4,121 |
99 |
0,53 |
0,281 |
100 |
1,53 |
2,34 |
98,8 |
-0,33 |
0,1089 |
99,6 |
1,13 |
1,277 |
98,4 |
-0,07 |
0,0049 |
96,67 |
-1,8 |
3,24 |
97,03 |
-1,44 |
2,073 |
96,3 |
-2,17 |
4,7089 |
Таблица 9.
№ |
Уровень |
Значение оптической плотности |
Взято рибоксина |
Найдено рибоксина |
R,% |
Метрологические характеристики |
1 |
1 |
0,347 |
0.2 |
0,201 |
100,5 |
R=98,47 SD= RSD= |
2 |
1 |
0,340 |
0,2 |
0,198 |
99 | |
3 |
1 |
0,345 |
0,2 |
0,200 |
100 | |
4 |
2 |
0,531 |
0,25 |
0,247 |
98,8 | |
5 |
2 |
0,535 |
0,25 |
0,249 |
99,6 | |
6 |
2 |
0,530 |
0,25 |
0,246 |
98,4 | |
7 |
3 |
0,595 |
0,27 |
0,261 |
96,67 | |
8 |
3 |
0,597 |
0,27 |
0,262 |
97,03 | |
9 |
3 |
0,593 |
0,27 |
0,260 |
96,3 |
Таблица 10.Оценка открываемости в зависимости от концентрации активного компонента в анализируемом образце.
Содержание аналита в образце, % |
Открываемость, % |
100 |
98-102 |
≥10 |
98-102 |
≥1 |
97-103 |
≥0,1 |
95-105 |
0,01 |
90-107 |
0,001 |
80-110 |
0,0001 |
80-110 |
0,00001 |
60-115 |
0,000001 |
40-120 |
Рассчитываем стандартное и относительное отклонение.
Рассчитанное значение RSD не больше, приведённого в таблице 7, методика соответствует требованиям валидации по показателю правильность.
Заключение: полученные результаты показывают, что методика соответствует требованиям валидации.
Список литературы
1. Аляутдин Р.Н.. Фармакология/ Под ред. Р.Н. Аляутдина. – 2-е изд., испр. – М.: ГЭОТАР – МЕД, 2004. – 592 с.: ил.
2.Анализ лекарственных смесей. / А.П. Арзамасцев, В.М. Печенников, Г.М. Родионова и др. — М.: Компания Спутник+, 2000. - 275с.
3. Арзамасцев AM. Стандартные образцы лекарственных веществ. / А.П. Арзамасцев, П.Л. Сенов. – М.: Медицина. 1978. – 248с.
4. Беликов В.Г. Фармацевтическая химия. В 2 ч.: Ч.1.Общая фармацевтическая химия; Ч.2. Специальная фармацевтическая химия: Учебник для вузов. – Пятигорск ,2003. – 720
5 Беликов В.Г. Современные синтетические и природные лекарственные средства: Кр. справочник. Изд. 2-е, перераб. и доп. /В.Г. Беликов. - Пятигорск: Пятигорск, гос. фармац. акад.. 2002. - 335с.
6. Белоусов Ю.Б. Клиническая фармакология и фармакотерапия. /Ю.Б. Белоусов, B.C. Моисеев, В.К. Лепахин. – М.: Универсум Паблишинг, 1997. – 531с.
7. Булатов М.И. Практическое руководство по фотоколориметрическим и спектрофотометрическим методам анализа. /М.И. Булатов, И.П. Калинкин. – Л.: Химия, 1976. – 376с
8.Гнеушев Е.Т. [и др.].Клиренс и превращения инозина в организме/ Е.Т.Гнеушев, В.В. Наумова, В.А. Богословский.- «Фармакология и токсикология», 1978, №6, с.714-719
9.Инозин, свойства и химическая
модификация ( обзор) –«Химико-
10. Компанцева Е.В. [и др.] Общие методы фармацевтического анализа: учебное пособие по фармацевтической химии для студентов 3 курса/ Е.В.Компанцева [и др.]: под ред. М.В, Гаврилина, Е.В. Компанцевой.- Пятигорск: Пятигорская ГФА, 2010.-140 с.
11.Серова И.П. [и др.] .Термостабильность инозина и его 8-замещённых производных./И.П.Серова, А.П. Селезнёв, Е.В. Комаров, В.А. Трофимов – Антибиотики, 1982,№6 с.9-13