Выявление и количественный учет микроорганизмов в различных средах

Работа  № 1

Тема: Выявление и количественный учет микроорганизмов в различных средах

 

 

Введение

 

Проблема обеспечения биологической безопасности охватывает широкий круг научных н практических задач, связанных с защитой технических устройств, сооружений, сырья и материалов от повреждений бактериями и грибами, как в условиях длительного хранения и при перевозке я эксплуатации.

В настоящее время в решении этой проблемы заинтересованы такие важнее отрасли экономики, как водный, воздушный и наземный транспорт, нефтедобывающая, нефтеперерабатывающая и нефтехимическая промышленность, строительство, энергетика и связь, эксплуатация технических сооружений и установок различного назначения. Активному нападению различных организмов подвергаются ценнейшие памятники культуры, стекло, разнообразные пластмассы, резина, различная аппаратура, дорожные покрытия, транспорт и многое другое. Микроорганизмы в условиях повышенной влажности могут повреждать детали и узлы радиоэлектронных, оптических и других приборов, ухудшать их электрофизические свойства, нарушать работу аварийной сигнализации, изменять структуру и состояние материалов. В настоящее время трудно найти группу материалов, на которую живые организмы не оказывают разрушающего действия, или, по крайней мере, не изменяют их свойств и внешнего вида.

Многообразие живых организмов, а также разнообразие материалов и изделий (круг которых непрерывно расширяется), на которые они нападают, определяет исключительную сложность проблемы обеспечения безопасности.

Вместе с тем, только выявление биоповреждающих ситуаций, их каталогизация и всестороннее изучение могут создать необходимую основу для прогнозирования биоповреждений и разработки стратегии защиты различных устройств, сырья и материалов от повреждений.

Кроме того, еще в семидесятые годы ХХ столетия Джеймс Ловок и микробиолог Линн Маргулис выдвинули теорию сложной регуляции атмосферы Земли биологическими объектами, согласно которой, микроскопические и другие организмы вместе с физической средой обеспечивают поддержание определенных геохимический условий на Земле, благоприятных для жизни.

Одними из наиболее благоприятных сред для развития разнообразных микроорганизмов является почва (педосфера) и вода (гидросфера). Например, число микроорганизмов в 1г почвы исчисляется сотнями миллионов и миллиардов.

Цель работы:

Определение количества микроорганизмов в почве, воде, воздухе.

Оборудование и материалы:

Чашки Петри, пипетки, термостат, мясопептонный агар, стерильная дистиллированная вода, образцы почвы, воды, воздуха (из различных мест), весы с разновесами, карандаш по стеклу.

 

 

Ход работы

Перед работой в лаборатории необходимо включить бактерицидную лампу в отсутствии людей.

 

Подготовка почвы и анализ почвенной вытяжки

1. Отвесить 1 г почвы, высыпать ее в колбу, залить 100 мл стерильной дистиллированной воды, закрыть стеклянной пробкой и тщательно взболтать 5 минут.
2. Взять 1 мл вытяжки, внести в 9 мл стерильной дистиллированной воды, перемешать.
3. Взять 1 мл и внести в стерильную чашку Петри (для черноземов следует ввести еще одно разведение до 0,00001 г).
4. Пробирки с водой открывать на минимальное время.
5. После внесения 1 мл вытяжки в стерилизованную чашку Петри вылить туда же стерильный агар-агар, имеющий температуру не выше 50^оС, толщиной слоя 4-5 мм.
6. Подписать чашки карандашом по стеклу.
7. Подсчет колоний вести в течение 1 недели через один день.
8. Результаты учетов занести в таблицу и провести расчеты.

 

Тип почвы	Число колоний
	В чашке	В 1г почвы
Черноземный
Каштановый
Песчаный

 

Таким образом, наиболее богата микроорганизмами черноземная почва.

 

Анализ воды

1. 1 мл водопроводной воды залить агаром (температура менее 50 ^оС) слоем 4-5 мм, перемешать, охладить, поставить в термостат.
2. Через 1 день проводить подсчеты в течение 1-2 недель.
3. Результаты занести в таблицу

 

Вода из	Число колоний
	В чашке	В 1л воды
Водопровода
Водопровода
Водопровода

 

Таким образом, вода лишена микроорганизмов.

 

Анализ воздуха

 

1. Приготовить агар-агар, залить в стерилизованную чашку Петри слоем 4-5 мл.
2. Выдержать открытой чашку Петри 30 минут в разных местах.
3. Через 1-2 недели подсчитать количество колоний.
4. Измерить площадь чашки.
5. Определить число микроорганизмов исходя из того, что за 5 минут на 1дм² (100см²) поверхности (при отсутствии ветра) оседает столько микроорганизмов, сколько их содержится в 10л воздуха.
6. Результаты занести в таблицу.

 

Условия опыта (место)	Число выросших колоний	Площадь чашки (см2)	Число микроорганизмов
			В 10л воздуха	В 1м3 воздуха (1000л)
Фойе
Кабинет 31150
Коридор

 

Таким образом, проведенный расчеты показывают, что воздух даже в самом оживленном месте (фойе) соответствует санитарным нормам содержанию микроорганизмов.