Ринотрахеит кошек

При герпетической форме  преобладают некротические процессы и серозно-фибринозная экссудация. В долях легких находят многочисленные уплотненные очаги серо-красного цвета. С поверхности разреза  в этих участках легкого выделяется немного мутной серовато-красной  жидкости. При других формах, когда  герпесвирусная инфекция осложнена бактериями или кокками, поражения носят характер катарально-фибринозно-гнойной бронхопневмонии. При этом с поверхности разреза легких и бронхов выделяется густой серовато-белый экссудат, напоминающий слизь и гной.

Лабораторная  диагностика

Патологический материал

Диагноз устанавливают на основании эпизоотологических, клинических, патологоанатомических данных и  результатов лабораторных исследований (обнаружение внутриядерных включений  в мазках истечений изо рта, носа, глаз, смывы с конъюнктивы, миндалин и выделение вируса в культуре клеток, а так же парные сыворотки крови). От павших животных для исследования берут кусочки пораженных слизистых оболочек, а так же лимфоузлы нижней челюсти и верхнего отдела трахеи.

Индикация вируса

 

Индикацию в патологическом материале проводят с помощью ПЦР, РИФ и биопробой в культуре клеток почек или фибробластво эмбрионов кошек.  ЦПД наблюдают уже через одни сутки.

Наиболее доступными для  владельцев кошек являются методы иммуноферментного  анализа (ИФА) и полимеразной цепной реакции (ПЦР). Методы ИФА направлены на обнаружение вирусного антигена в естественных истечениях у кошек. Данная группа методов достаточно чувствительна  и достоверна, но все же уступает методам ПЦР. Последние в отличие  от ИФА в истечениях индицируют и  идентифицируют нуклеиновую кислоту  возбудителя.

Вирус герпеса вызывает через 4...6 сут характерный цитопатический эффект (ЦПЭ) с образованием вначале очагов из крупных округленных клеток, быстро увеличивающихся и распространяющихся на весь монослой. Часто возможно появление гигантских клеток (синцитий). По мере развития ЦПЭ происходит дегенерация клеток и отторжение их от стекла. В препаратах, окрашенных гематоксилин-эозином, выявляются внутриядерные включения, характерные для герпеса.

Не исключена возможность, что изменения вызваны калицивирусом, но в этом случае ЦПЭ наступает через 12...24 ч в виде очагов округленных клеток и быстро распространяется на весь монослой, в результате чего происходит отторжение клеток от стекла и разрушение монослоя. В окрашенных препаратах включения отсутствуют.

Выделение вируса

Окончательный диагноз можно  установить при выделении вируса в культуре клеток и его идентификации  серологическим методом. При лабораторной диагностике для выделения вируса используют назальные, конъюнктивальные истечения или ротоглоточные пробы материала; от павших животных чаще всего исследуют трахею, легкие. После соответствующей подготовки исследуемым материалом заражают первично-трипсинизированную или субкультуру клеток почки котенка, а также перевиваемую линию клеток почки кошки.

Для этого используют 7 проб биоматериала от животных, давших положительные результаты на наличие вируса при исследовании методом ПЦР.

В результате исследований в первичнотрипсинизированной культуре клеток почки котенка выделяют один изолят.

Первые признаки цитопатического действия вируса наблюдают уже через 24 часа после заражения. Через 48 часов отмечают поражение более 50% монослоя клеток.

Выделенный изолят вызывает характерные изменения в монослое клеток на протяжении трех последовательных пассажей, развитие ЦПД в  ранние сроки (на 1-ые сутки инкубирования) и накапливается в высоких титрах - до 6,75 lg ТЦД 50/мл.

Выделенный изолят типируют при помощи ПЦР и моноспе-цифической гипериммунной кроличьей сыворотки.

Индентификация

Идентификацию выделенного  агента проводят в РН с применением  гипериммунных сывороток к вирусу ринотрахеита или калицивирусу на культурах клеток.

Этиологическая роль выделенного  вируса

Выявление вируса ринотрахеита кошек методом ПЦР в пробах биоматериала от животных с поражениями органов воспроизводства, подтвержденное выделением вируса в культуре клеток и высоким уровнем сероконверсии к нему у переболевших животных, предполагает этиологическую роль вируса в данной патологии.

При дифференциальной диагностике  следует иметь в виду, что у  кошек причиной респираторных поражений  помимо вируса ринотрахеита могут быть пикорнавирусы, реовирусы, микоплазмы, хламидии. Дифференцируют болезнь в основном от калицивироза и хламидиоза. При некотором сходстве этих инфекций для хламидиоза более типично проявление в виде лишь конъюнктивита, а для калицивироза — стоматита. Часто ринотрахеит кошек возникает в смешанной форме с калицивирусной инфекцией и панлейкопенией.

 

Ретроспективная сериодиагностика.

 

Проводят, титруя антитела в  парных сыворотках в РН. Ретроспективный диагноз ставят при исследовании проб сыворотки крови от кошки и асцитной жидкости  от рожденного котенка путем выявления вируснейтрализующих антител в высоких титрах: 1:64 и 1:16.

Особенности иммунитета и специфическая профилактика 

Длительность иммунитета у переболевших животных

Переболевшие животные приобретают  кратковременную невосприимчивость. Максимальный уровень формируется  к 21 дню после заражения с существенным снижением через 5 месяцев. Титры антител невысокие, растут медленно и даже к 40 дню могут выявляться только у 70% кошек. В некоторых случаях вирусы герпеса способны к ассоциированию с клеткой и переходу из клетки в клетку, минуя межклеточное пространство.  В связи с этим при развитии вызванной ими болезни большое значение имеет клеточный иммунитет.

Получаемые от матери антитела могут присутствовать у котят  в течение 2-10 нед. На среднем уровне, падая ниже определенного уровня к 6-9 недельному возрасту.

Препараты для специфической профилактики

Для профилактики заболевания  предложены живые и инактивированные вакцины. Первые готовят из аттенуированного штамма вируса, размноженного в культуре клеток почек котят. Для аттенуации вирулентного штамма вируса требуется не менее 50 пассажей при температуре 33-35°С. Живая сухая вакцина, полученная из такого штамма, безопасна и высокоэффективна.

Используют три типа вакцин: живую аттенуированную для парентерального введения; живую вакцину для интраназального введения и инактивированную вакцину с адъювантом для парентерального введения.

   Начиная с 4-5 суток после  введения, живые вакцины создают  у восприимчивых животных устойчивость к заражению. Негативной стороной применения живых вакцин является возможность  поствакцинальных реакций и экскреция  вакцинного вируса в окружающую среду  в течение первых шести суток после прививки.

   Вакцинация кошек инактивированными  вакцинами создает напряженный  иммунитет продолжительностью 12 месяцев  через две недели после второй инъекции вакцины (интервал между введением  вакцины составляет 3 недели). При  этом данные иммунобиологические препараты  полностью лишены негативных последствий, которые имеются у живых вакцин.

Для активной иммунопрофилактики кошек применяют комбинированные (ассоциированные) аттенуированные  вакцины из штамма F-2 — «Мультифел-3» (против панлейкопении, ринотрахеита и калицивирусной инфекции кошек), «Мультифел-4» (против панлейкопении, ринотрахеита и калицивирусной инфекции и хламидиоза кошек); Нобивак Трикэт (ринотрахеита, калицивироза, панлейкопении); Корифелин (герпесвирус, калицивироз); Леукорифелин (герпесвирус, калицивироз, панлейкопения); Квадрикат (бешенство, калицивироз, герпесвирус, панлейкопения).

Котята должны подвергаться вакцинации первоначально в возрасте 9 недель с последующей ревакцинацией  через 3-4 недели. Иммунитет сохраняется до года. Взрослые кошки прививаются однократно ежегодно. Иммунитет у привитых животных наступает через 14 дней после второй иммунизации и сохраняется в течение 1 года

 Для серопрофилактики  применяют препараты «Витафел» и «Витафел-С».

   Также учеными ведутся разработки по созданию на основе герпесвируса кошек типа 1 эффективных векторных систем для экспрессии протективных антигенов вирусов лейкоза кошек (FeLV) и иммунодефицита кошек (FIV) в клетках эукариот.

   Наиболее эффективным средством  неспецифической терапии заболевания  является изоляция животных и/или устранение любых возможных контактов другими  кошками, а также по возможности  и с их владельцами. После выявления заболевших особей следует провести дезинфекцию помещений, оборудования и различных акссесуаров кошек 1-2%-ным раствором едкого натра, 1-2%-ным раствором хлорамина, а также препараты хлорной извести и виркон С.

Серологическая  оценка поствакцинального иммунитета

Аттенуированный штамм сохраняет выраженную антигенность и пригодность в качестве вакцинного после 300 и более пассажей в культуре клеток. Кошки, привитые интраназально живой вакциной из термочувствительного штамма, становятся устойчивыми к интраназальному заражению вирулентным штаммом. Вакцинация сопровождается незначительной реакцией и выделением вакцинного вируса в течение шести дней. Устойчивость к экспериментальному заражению обнаруживается через четыре дня. Экскреция вирулентного вируса была низкой. Инактивированую вакцину получают из культурального ГВК-1 с помощью БПЛ (b-пропиолактоном). Напряженный иммунитет и высокий титр гуморальных антител отмечают после двукратного введения вакцин. Антитела сохраняются в крови в течение 10 мес. и в это же время имеет место бустерный эффект на повторную вакцинацию, а также обнаруживается антителозависимая цитотоксичность, обусловленная лейкоцитами.

 

Заключение

Возбудитель впервые выделили в США и идентифицировали как  герпесвирус Кранделл и Мауер (1957). Болезнь впервые описал в США в 1957 г. Фостьер.

Заболевание зарегистрировано в большинстве стран мира, характеризуется  поражением в большинстве случаев  респираторного тракта. Отличается сезонностью; чаще наблюдается в весенний и  осенний периоды.

Важным биологическим  свойством вируса является формирование состояния латенции, при котором переболевшие животные, остаются пожизненными вирусоносителями. В некоторых питомниках по выращиванию кошек до 97% животных могут иметь специфические антитела к FeHV-1, что свидетельствует об энзоотическом характере инфекции. При таком типе течения болезнь сопровождается периодическими рецидивами с выделением вируса во внешнюю среду. Однако у неиммунных животных  ринотрахеит протекает значительно тяжелее с вовлечением в инфекционный процесс до 100% животных

С целью повышения эффективности  противоэпизоотических мероприятий  при ринотрахеите кошек наряду с клиническим обследованием необходимо проводить лабораторные диагностические исследования биоматериала от животных с признаками респираторных и гинекологических болезней. Для первичного диагноза на ринотрахеит кошек  эффективно использовать метод ПЦР, а для окончательного - вирусологические и серологические исследования.

Лечение больных животных проводят индивидуально с учетом клинических признаков болезни. Так как в основном поражается респираторный тракт, необходимо в  первую очередь обеспечить свободное  дыхание через нос, особенно при  обильных серозных или гнойных выделениях, и лечение глаз. Одновременно назначают  антибиотики широкого спектра орально  или парэнтерально против секундарной микрофлоры. При промывании глаз, ноздрей, обработке ротовой полости хороший эффект оказывают антисептики или антибиотики.

Для устранения дегидратации используют различные жидкости и  электролиты. Поддержание жизненных  сил организма обеспечивают витамины А, В и С.

Из специфических средств  для лечения и профилактики применяют  отечественный иммуноглобулин поливалентный  против панлейкопении, инфекционного  ринотрахеита и калицивироза кошек («Витафел»). Препарат содержит высокоочищенные фракции бета- и гамма-глобулинов, выделенных из сыворотки иммунных кошек. «Витафел» создает пассивный иммунитет в течение 2 нед. Пассивный иммунитет у котят формируется колостральным путем; продолжительность его зависит от титров материнских антител и защищает в течение 5-8 нед. Однако надежная корреляция между материнскими вируснейтрализующими антителами и продолжительностью пассивного иммунитета отсутствует. Некоторые котята с высокими титрами материнских антител к вирусу ринотрахеита оказались более чувствительными при заражении вирулентным вирусом, а с низкими титрами — устойчивы к заражению.

В качестве средства этиотропной  терапии инфекционного ринотрахеита достаточно успешно зарекомендовал себя максидин. Препарат применяют подкожно по 0,5 мл 2 раза в день в течение 5-и дней (поскольку препарат болезненный, котятам вводят его вместе с 0,5% новокаином). При таком методе лечения улучшение наступает уже на 3-ий день после начала лечения, а к 5-7-м суткам в 87% случаев наблюдается полное выздоровление. Однако при использовании в качестве средства этиотропной терапии только максидина в 13% случаев может наблюдаться хронизация вирусного инфекционного процесса, и выздоровление наступает лишь через 2-3 недели после начала лечения. Для повышения эффективности лечения в последнее время используют максидин в сочетании с фоспренилом. При этом схема применения максидина остается такой же, как описано выше, а фоспренил применяют перорально в дозе 0,5 1 мл 1 раз в день в течение 2-х дней с сочетании с ежедневной обработкой слизистой языка и неба (в случаях изъязвления), а также используют максидин в форме глазных капель в случаях гнойных истечений из глаз. Такая схема этиотропной терапии дает практически 100%-ное излечение уже на 4-5-й день, при этом не наблюдается случаев хронической инфекции. Повышение эффективности лечения с помощью одновременного применения обоих препаратов может, по нашему мнению, объясняться тем обстоятельством, что каждый из них в отдельности, согласно экспериментальным данным, обладает противирусным действием в отношении вируса герпеса. Логично предположить, что при применении максидина и фоспренила наблюдается синергистический ("удвоенный") противовирусный эффект.