Использование лабораторных животных в лабораторной диагностике особо опасных вирусных инфекций

СОДЕРЖАНИЕ

ВВЕДЕНИЕ	2
ОСНОВНАЯ ЧАСТЬ	3
1.Животные в  бактериологической лаборатории	3
2.Краткие сведения о содержании, разведении, кормлении и заболеваниях  лабораторных животных	3
2.1 Правила пополнения вивария  новыми животными	5
2.2 Уборка и дезинфекция  вивария	10
2.3 Личная гигиена работников  питомника (вивария)	11
2.4 Правила кормления лабораторных животных	11
2.5 Заболевания лабораторных животных	13
3. Подготовка животных к заражению	15
3.1 Определение  пола	16
4.Подготовка материала и инструментов  для заражения	17
4.1 Подготовка шприцов к заражению	18
5. Фиксация, методы заражения и взятия крови у лабораторных животных	19
5.1 Фиксация  животных	19
5.2 Способы заражения	22
5.2.1 Внутрикожный метод	22
5.2.2 Подкожный способ заражения	23
5.2.3 Внутримышечный способ заражения	23
5.2.4 Внутрибрюшинный способ заражения	23
5.2.5 Внутривенное заражение  кроликов	24
5.2.6 Внутривенное заражение крыс и мышей	24
5.2.7 Заражение через пищеварительный тракт	24
5.2.8 Заражение через дыхательные  пути (интраназальное заражение)	26
5.2.9 Заражение в переднюю камеру глаза (интраокулярный метод)	26
5.2.10 Внутримозговой метод (интрацеребральный)	27
5.2.11 Внутриплевральный метод	27
5.3 Содержание животных под опытом	27
5.3.1 Взятие крови у лабораторных  животных и ее обработка	27
5.3.2 Пункция сердца кроликов	27
5.3.3 Пункция сердца у морских свинок	28
5.3.4 Пункция сердца у крыс	28
5.3.5 Тотальное обескровливание кролика	28
5.3.6 Взятие крови из  вены уха кролика	29
5.3.7 Взятие крови из  вен у морских свинок, крыс  и мышей	29
5.4 Получение дефибринированной крови	30
5.4.1 Приготовление взвеси  эритроцитов	30
5.4.2 Приготовление сыворотки  крови	30
5.4.3 Приготовление цитратной  крови	31
5.4.4 Приготовление плазмы  крови	31
6. Умерщвление и  вскрытие лабораторных животных	31
6.1 Вскрытие животных	32
ЗАКЛЮЧЕНИЕ	35
СПИСОК ЛИТЕРАТУРНЫХ ИСТОЧНИКОВ	36

 

 

 

 

 

 

ВВЕДЕНИЕ

Подсчитано, что ежегодно в мире используется 50 – 100 миллионов позвоночных животных. Несмотря на исключительную важность беспозвоночных для ряда широкого спектра экспериментов, их использование никак не контролируется, а учёт количества не ведется. Большинство животных после применения в опытах усыпляется. Большинство лабораторных животных специально разводят, однако некоторых ловят в дикой среде либо покупают на аукционах и в приютах.

Опыты проводятся в университетах, медицинских училищах, фармацевтических компаниях, фермерских хозяйствах, оборонных предприятиях и коммерческих лабораториях (которые обслуживают нужды промышленности). Опыты относятся к генетике, биологии развития, этологии и прикладным исследования типа биомедицинских, ксенотрансплантации, тестирования лекарств, токсикологических опытов (в том числе тестирование косметики и бытовой химии). Животных используют для обучения студентов и в оборонных исследованиях.

Практически все достижения в медицине XX века каким-либо образом зависели от опытов на животных. Даже мощнейшие компьютеры не способны смоделировать взаимодействие молекул, клеток, органов, тканей, орга-низмов и окружающей среды, что делает опыты на животных необходимыми.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

ОСНОВНАЯ ЧАСТЬ

1.Животные в бактериологической лаборатории

В диагностической работе бактериологических лабораторий часто приходится прибегать к заражению так называемых лабораторных, или опытных, животных. Чаще всего в повседневной практике применяют для этой цели мелких, наиболее дешевых, животных: белых мышей и крыс, морских свинок, кроликов, а из птиц-голубей и кур. Реже используют собак и кошек, еще реже – различные виды сельскохозяйственных животных. Цель биологических методов исследования заключается в определении патогенности или степени вирулентности исследуемого материала, выделении из материала чистых культур микробов, отделении патогенных микроорганизмов из смеси с сапрофитными видами и т. д. Широкое применение находят лабораторные животные и в серологической практике: морские свинки – для получения комплемента, кролики (овцы, телята) – при изготовлении различных агглютинирующих сывороток, гемолизина, эритроцитов и т. п. Для изготовления специальных питательных сред от животных получают кровь, сыворотку, различные органы, ткани и т. д. Кроме того, лабораторные животные широко используются при определении качеств биологических и химиотерапевтических препаратов, а также научно-экспериментальной работе. Лабораторные животные служат также для диагностики некоторых инфекционных заболеваний, моделирования экспериментальных острых и хронических инфекционных процессов, установления вирулентности и токсигенности изучаемых штаммов микробов, определения активности приготовленных вакцин и исследования их на безвредность.

Бактериологические лаборатории для повседневной работы обычно разводят лабораторных животных в специально организованных для этой цели питомниках. Это дает возможность всегда получать в достаточном количестве проверенный и безупречного качества подопытный материал. Если животные не разводятся, а только содержатся в лаборатории, то помещение для них носит название – виварий. Новые партии животных закупаются в питомниках. Условия содержания и кормления в данных подразделения практически аналогичны, поэтому в ниже приведенном материале не будет дифференциации между указанными структурами лаборатории.

 

2.Краткие сведения о содержании, разведении, кормлении и заболеваниях лабораторных животных

Содержание животных в питомниках должно по возможности соответствовать условиям существования их в природе. Это положение особенно относится к диким, родившимся на воле животным и птицам (дикие голуби, воробьи, домашние серые мыши и крысы). В неблагоприятных для них условиях содержания и кормления эти животные быстро погибают в неволе (особенно воробьи и серые мыши). Обязательным условием успешной работы питомника является строгое соблюдение всех ветеринарно-санитарных, зоотехнических и зоогигиенических правил. Последние предусматривают содержание животных в просторных, светлых, сухих и чистых клетках, в хорошо вентилируемых, с нормальной температурой помещениях, рациональное и полноценное кормление и проведение профилактических мероприятий в целях предупреждения различных заболеваний. Громадное значение для питомника имеет хороший состав производителей (самцов и самок).

Питомник (виварий) должен иметь несколько отделений для содержания различных видов животных (кролики, морские свинки, мыши и т. д.).

В структуру вивария входят:

1.  отделение для карантинирования и адаптации вновь поступивших животных;

2.  экспериментально-биологическая клиника для содержания животных, находящихся в опыте;

3. изоляторы для подозрительных на инфекционные заболевания и заведомо больных животных, уничтожение которых по условиям эксперимента нежелательно;

4. экспериментальное помещение (или манипуляционная), в котором осуществляются взвешивание, термометрия, заражение, вакцинация животных, взятие у них крови и некоторые другие процедуры.

Оборудование экспериментального помещения определяется в каждом конкретном случае задачами и условиями проводимых научных исследований.

Карантинное отделение, отделение для подопытных и изолятор для инфицированных животных размещаются в помещениях, строго изолированных одно от другого и от всех остальных помещений вивария.

Кроме основных перечисленных выше структурных единиц, в составе вивария должны находиться:

а)   кормокухня из двух смежных помещений для переработки и изготовления кормов с самостоятельными выходами в коридор из каждого помещения, кладовая со специально оборудованными ларями (металлическими или обитыми внутри жестью) и холодильниками для хранения запаса кормов,

б)   дезинфекционно-моечное отделение из 2 комнат, объединенных переходным автоклавом или сухожаровой камерой.

Работа дезинфекционно-моечного отделения определяется состоянием материала, поступающего на обработку. Инфицированный материал, например клетки, подстилки, кормушки, вначале дезинфицируют, а затем подвергают механической чистке и мойке. Материал, не представляющий опасности для заражения, вначале подлежит механической очистке, а затем (при необходимости) стерилизации.

Моечное помещение в правильно организованном виварии имеет мусоропровод для удаления нечистот и грузоподъемник для доставки в виварий материала и оборудования.

Рядом с дезинфекционно-моечным отделением размещаются склад чистого (запасного) инвентаря с клетками, поилками, кормушками и т. п., бытовые помещения и санитарный блок (душевая и туалет) для обслуживающего персонала.

В соответствии с существующими санитарными правилами, виварий размещается в отдельно расположенном здании или на верхнем этаже лабораторного корпуса. При размещении вивария в лабораторном корпусе он должен быть полностью изолирован от всех других помещений.

Помещение для содержания лабораторных животных должно быть теплым, светлым и сухим с центральным отоплением, естественным и искусственным освещением, принудительной приточно-вытяжной вентиляцией, подводкой горячей и холодной воды.

Полы в виварии делают из водонепроницаемого материала, без плинтусов, с уклоном к отверстиям или желобам, присоединенным к канализации. Стенки покрывают глазурованной плиткой, потолки и двери окрашивают масляной краской.

 

2.1 Правила пополнения  вивария новыми животными

Пополнение вивария новыми лабораторными животными проводят из государственных специализированных питомников в сопровождении ветеринарного свидетельства, удостоверяющего, что животные поступают из хозяйства, благополучного по инфекционным заболеваниям, и клинически здоровы. Животных принимают в чистые, заранее продезинфицированные клетки, размещают в карантинном отделении сроком на 3 дня для адаптации к новым условиям. В период карантина за животными ведется регулярное клиническое наблюдение с ежедневной термометрией и регистрацией общего состояния в специальном журнале по приводимой ниже форме.

 

Таблица 1 – Журнал регистрации поступления и распределения лабораторных животных в экспериментально-биологической клинике (виварии)

Дата поступления	Вид животных	Пол	Масса тела, возраст	Постав- щик	Распределение (No клетки)	Наблюдение во время карантина	Дата окончания карантина	Кому выданы животные

 
         Для животных, полученных не из государственных питомников, устанавливаются следующие сроки карантинирования: для мышей и крыс—14 дней, для морских свинок и кроликов—21 день.

В целях предупреждения заноса и распространения инфекции в виварии уход и наблюдение за животными, находящимися в карантине, осуществляются персоналом, закрепленным за данным отделением. По этим же соображениям запрещается выносить из карантинного отделения в другие помещения вивария корма, спецодежду и инвентарь.

Чистка и мойка посуды, клеток и другого инвентаря из карантинного помещения производится в общем дезинфекционно-моечном отделении вивария только после предварительного обеззараживания. Методы дезинфекции в каждом конкретном случае определяются соответственно специфике работы учреждения.

В случае появления в карантинном отделении подозрения на инфекционное заболевание животные подвергаются бактериологическому обследованию. При подтверждении инфекции вся поступившая партия животных уничтожается.

При возникновении массовых заболеваний среди животных, находящихся в карантине, или при обнаружении в период экспериментов отдельных случаев инфекционных заболеваний, особо опасных для лабораторных животных, в виварии проводится необходимый комплекс профилактических мероприятий. В этих случаях опыты на животных временно прекращаются.

Правила содержания экспериментальных животных в виварии

По истечении карантинного срока животных переводят в экспериментальную секцию. Мышей, крыс, морских свинок и кроликов содержат в клетках, установленных на металлических стеллажах. Грызуны содержатся в клетках со сплошным дном на подстилке или с сетчатым дном-полом. Подстилочным материалом могут служить древесные опилки, стружка, волокнистый торф, мягкая солома. Подстилки заранее автоклавируют или дезинфицируют в сухожаровой печи при температуре 150—180°С в течение 15—20 мин. При размещении животных по клеткам следует исходить из приводимых ниже нормативов (табл. 2).