Тиамина хлорид, тиамина бромид. Синтез (методика). Способы качественного и количественного анализа в фармакопеях разных стран, с привиден

Параллельно проводят контрольный опыт из 10.0 мл хлороформа  и 10.0 мл раствора йодной и уксусной кислот.

Количество 1 -моноглицеридов (X) в субстанции, в пересчете на моноглицеростеарат, в процентах, вычисляют по формуле:

                                                                                (V₂ - V_x)-K-0.0179 100-100             (V₂ - V_x)-K-\1.9

X =  —  = ■     

                                                                                                                                                                      уґі ' 10

 

 

ТИАМИНА ГИДРОХЛОРИД

Количественное  определение

0.150 г субстанции  растворяют в смеси 5 мл кислоты  муравьиной безводной, добавляют 65 мл кислоты уксусной безводной  и при перемешивании, добавляют 10 мл раствора ртути (ІІ) ацетата. Раствор титруют 0.1 М раствором кислоты хлорной. Точку эквивалентности определяют потенциометрически.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0.1 М раствора  кислоты хлорной соответствует 21.31 мг C₁₂H₁₈Cl₂N₄OS

ТИАМИНА ГИДРОХЛОРИД

Испытания на чистоту

Раствор S. 2.5 г субстанции растворяют в воде, свободной от углерода диоксида, приготовленной из воды дистилированной , и доводят объем тем самым раствором до 25 мл.

Прозрачность  раствора. 2.5 мл раствора S доводят водой Р до объема 5 мл. Полученный раствор должен быть прозрачным.

Цветность раствора. Окраска раствора, приготовленного для испытания "прозрачность раствора", должна быть не интенсивнее эталона Y7 или Gy7.

рН. От 2.7 до 3.3. Методика: 2.5 мл раствора S доводят водой, свободной от углерода диоксида до объема 10 мл.

Количественное  определение

0.150 г субстанции  растворяют в смеси 5 мл кислоты  муравьиной безводной, добавляют 65 мл кислоты уксусной безводной  и при перемешивании добавляют 10 мл раствора ртути (ІІ) ацетата. Раствор титруют 0.1 М раствором кислоты хлорной. Точку эквивалентности определяют потенциометрически.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0.1 М раствора  кислоты хлорной соответствует 21.31 мг C₁₂H₁₈Cl₂N₄OS

Примеси.

А. 4-метил-5-(3-оксиэтилтиазол

В. 2-метил-4-амино-5-оксиметилпиримидин

Б) Фармакопея США, 2007 г

ТИАМИНА ГИДРОХЛОРИД

 

Идентификация.

А: Инфракрасный спектр ''197K''  Образцы выдерживают при 105 градусах в течение 2 часов

B: Раствор (1 к 50) отвечает  испытаниям на хлориды. 

 

pH «791»: между 2.7 и 3.4, в растворе (1 к 100).

 

Остаток на воспламенение  - 281: не более 0.2%.

 

 Спектр  поглощения раствора— Растворите 1.0 г в воде, чтобы получилось 10 ml. Спектр поглощения этого раствора, после фильтрации через пористый фильтр, при длине волны 400 нм и толщиной стеклянной кюветы 1-см, раствор сравнения – вода, не должен превышать 0,025

 

Предел нитратов - К 2 ml разбавленного раствора  (1 к 50) добавляют 2 mL серной кислоты, прохлады, и добавляют 2 mL сульфата железа: на стыке двух слоев не образуется коричневого кольца.

 

Хроматографическая  чистота

Раствор А, раствор B, и  подвижная фаза - подготовка, как  указано в анализе.

 

Испытуемый раствор - Растворите точно взвешенное количество тиамина гидрохлорида в мобильной фазе, чтобы получить раствор, имеющий концентрацию около

Процедура - около 10 мл испытуемого  раствора помещают в хроматограф, и хроматографируют. Испытуемый раствор элюируют не менее чем трижды времени главного пика. Запись хроматограммы: измеряют области пиковых ответов: итог ответов всех вторичных пиков не больше, чем 1.0% от итога ответов всех пиков.

 

 Химический анализ

Раствор А - Подготовка 0,005 М раствор натрия 1-октансулфонат  в разбавленной уксусной кислоте (1 на 100).

Раствор В - Приготовить  смесь метанола и ацетонитрила (3:2).

Подвижная фаза - Приготовить  смесь из раствора А и раствора В (60:40), фильтруют и дегазируют.

Внутренний стандартный  раствор - помещают 2,0 мл метилбензоата в мерную колбу на 100 мл, добавляют метанол  до метки и перемешивают.

Подготовка стандарта - Растворите точное количество тиамина  гидрохлорида в мобильной фазе, чтобы получить раствор, имеющий концентрацию около 1 мг / мл. Помещают 20,0 мл этого раствора в мерную колбу на 50 мл, добавляют 5,0 мл раствора внутреннего стандарта, разбавляют мобильной фазой, до получения раствора с известной концентрацией около 400 мг / мл.

Подготовка химического  анализа – помещают точно взвешенное количество (около 200 мг) тиамина гидрохлорида в 100-мл мерную колбу, растворяют  подвижной фазой до объема до метки, и перемешивают. 10,0 мл этого раствора помещают в мерную колбу, добавляют 5,0 мл раствора внутреннего стандарта, разбавляют с мобильной фазой до метки, и перемешивают.

Хроматографические системы  - жидкостный хроматограф оснащен детектором 254-нм и 4-мм х 30-см столбца, который содержит упаковки L1. Скорость потока составляет около 1 мл в минуту. Эффективность колонки - пик не менее 1500 теоретических тарелок; и относительное стандартное отклонение для репликации инъекций составляет не более 2,0% .

В) Японская Фармакопея, 14 изд, 2007 г

ТИАМИНА ХЛОРИД ГИДРОХЛОРИД

 

Температура плавления: около 245 °C (с разложением).

Идентификация:

 1) К 5 mL раствора тиамина гидрохлорида (1 в 500) добавляют 2.5 mL едкого натрия TS и 0.5 mL гексацианоферрата калия (III). Затем добавляют 5 mL 2-метил-l-пропанол, смесь встряхивают энергично в течение 2 минут, оставляют стоять, и исследуют под ультрафиолетовым светом (длина волны: 365 нм): 2-метил-l-пропаноловый слой показывает багровое свечение. Это свечение исчезает, когда смесь подкисляют, но вновь появляется, когда она снова станет щелочной.

 

2) Определение спектра поглощения раствора тиамина гидрохлорида проводят (1 в 100,000) спектрофотомерией, и сравнивают спектр со Справочным Спектром или спектром раствора тиамина гидрохлорида - стандарта, приготовленного так же, как и типовой раствор. 

 

3) Определение инфракрасного поглотительного спектра: тиамина гидрохлорид заранее высушивают при температуре 105°C в течение 2 часов, как сказано в методе «Инфракрасная Спектрофотометрия», и сравнивают спектр со Справочным Спектром, или со спектром тиамина гидрохдоридоа – стандара, заранее высушенного при температуре 105°C в течение 2 часов. 

 

Раствор тиамина гидрохлорида (1 в 500) отвечает качественным испытаниям на хлориды.

 

Вода. Не более 5,0% (30 мг, кулонометрического титрования).

Остаток после  сжигания: не более чем 0,2% (1 г).

 

Химические  испытания:  Берут точную навеску около 0,1 г тиамина хлорида гидрохлорид и тиамина хлорида гидрохлорида - Стандарт (отдельно определить воду таким же образом, как сказано выше), и растворить их в подвижной фазе до 50 мл. К 10 мл каждого из растворов, точно измеряют и добавляют ровно 5 мл раствора внутреннего стандарта, добавляют подвижную фазу, чтобы получился объем, равный  50 мл, и используют эти растворы, как растворы образца и стандартные растворы. Выполняют проверку с 10 FIB каждого из образца и стандартных растворов, как указано в жидкостной хроматографии в соответствии со следующими условиями, и рассчитать коэффициенты: Qr и Qs, от площади пика тиамина, что и внутренний стандарт.

Внутренний стандартный  раствор A - раствор бензоат метила в метаноле (1 к 50).

Детектор: Ультрафиолетовый поглотительный фотометр (длина волны: 254 нм). Колонка: Колонка нержавеющей стали 4.6 mm с внутренним диаметром и 15 см в длине. Температура колонки: Постоянная температура около 25°C.

Д) Государственная  Фармакопея СССР 10-е изд, 1968 г

 

 

ТИАМИНА БРОМИД

 

Подлинность. 0,05 г  препарата растворяют в 25 мл воды. К 5мл раствора приливают 1 мл раствора ферроцианида калия, 1 мл раствора едкого натра, 5 мл бутилового или изоамилового спирта, хорошо встряхивают и дают отстоятся. В верхнем слое возникает наблюдаемая в ультрафиолетовом свете синяя флюоресценция, исчезающая при подкислинии и вновь возникающая при подщелачивании.

 

5 мл того же раствора дают характерные реакции на бромиды.

 

Количественное определение. Около 0,05 г препарата (точная навеска) растворяют в 100 мл воды, прибавляют 4 мл концентрированной соляной кислоты, быстро нагревают до кипения, к кипящему раствору приливают по каплям 4 мл 10% раствора кремневольфрамовой кислоты и кипятят 4-5 минут. Образовавшийся осадок отфильтровывают при разрежении на предварительно высушенный до постоянного веса стеклянный фильтр № 4 диаметром 2-4 см. Осадок промывают на фильтре 50 мл горячей разбавленной (1:20) соляной кислоты, 10 мл воды и ацетоном дважды по 5 мл. Фильтр с осадком высушивают до постоянного веса при 100 – 105 °C, охлаждают  в эксикаторе над пятиокисью фосфора и взвешивают. Вес осадка, умноженный на 0,25 соответствует С12Н17BrN4OS * HBr * ½ H2O, которого в препарате должно быть не менее 98%.

 

 

ТИАМИНА ХЛОРИД

Подлинность

1. 0,05 г  препарата растворяют в 25 мл воды. К 5мл раствора приливают 1 мл раствора феррицианида калия, 1 мл раствора едкого натра, 5 мл бутилового или изоамилового спирта, хорошо встряхивают и дают отстоятся. В верхнем слое возникает наблюдаемая в ультрафиолетовом свете синяя флюоресценция, исчезающая при подкислинии и вновь возникающая при подщелачивании.
2. К 5 мл того же раствора добавляют 1 мл соляной кислоты, 1 мл раствора хлорамина, 1 мл хлороформа и взбалтывают, в хлороформном слое не должно появлятся желтое окрашивание.
3. 5 мл того же раствора дают характерные реакции на хлориды (стр 747)

 

Количественное определение. Около 0,1 г препарата (точная навеска) растворяют в 20 мл ледяной уксусной кислоты при слабом нагревании. Раствор охлаждают, прибавляют 5 мл раствора ацетата окисной ртути и титруют 0.1 н. раствором хлорной кислоты до изумрудно-зеленой окраски (индикатор - кристаллический фиолетовый). Параллельно проводят контрольный опыт.

I мл 0,1 н. раствора хлорной кислоты соответствует 0.01686 г С12Н17ClN4OS • НС1, которого в пересчет на сухое вещество должно быть не менее 98%.

Е)  Государственная фармакопея РФ, 12 издание, 2008 г

Подлинность.

Инфракрасный спектр субстанции, снятый в таблетке с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см^-1 по положению полос поглощения должен соответствовать рисунку спектра тиамина хлорида.

0,025 г субстанции растворяют а воде и разбавляют водой до 1000 мл. Ультрафиолетовый спектр полученного раствора субстанции в области от 220 до 350 нм должен иметь максимумы при 237 нм и 262 им.

Субстанция дает характерную реакцию на хлориды.

Прозрачность раствора. Раствор 2,5 г субстанции в 25 мл воды должен быть прозрачным или выдерживать сравнение с эталоном I.

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании на Прозрачность раствора, должен выдерживать сравнение с эталоном Y 7 или GY7.

рН От 2,7 до 3,4 (5 % раствор).

Посторонние примеси. Испытание проводят методом ВЭЖХ.

Испытуемый раствор. 0,175 г субстанции помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, растворяют в 7,5 мл смеси уксусная кислота ледяная - вода (1:19), доводят объем раствора водой до метки и перемешивают.

Раствор сравнения. I мл испытуемого раствора помещают в мер]гую колбу вместимостью 50 мл, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают. 5 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают.

Раствор для проверки пригодности системы.  0,005 г субстанции и 0,005 г стандартного образца примеси Е 3-[(4-амино-2-метилпиримидин-Зил )метил]-5-(2-гадронси-этил)-4-метилтиазол-2(3Н)-тиона (стандарт ВР или аналогичного качества) помещают в мерную колбу вместимостью 250 мл, растворяют в 4 мл смеси уксусная кислота ледяная - вода (1:19), доводят объем раствора водой до метки и перемешивают.

Хроматографические условия

Колонка   250 х 4,6 мм с октадецилсиликагелем (С18),  
                 10 мкм;

 

Температура Подвижная фаза (ПФ)

Градиентный режим

Время(мни)	ПФ А (%)
0-25	90 => 70	Ш=>30
	70 => 50	Э0->50
33-40	50	50
40-45	50"->90	50 10

 

Скорость потока 1,0 мл/мин;

Детектор спектрофотометрический, 248 нм; 20 мкл.

Объем пробы 20 мкл

 

Хроматографируют раствор для проверки пригодности системы. Разрешение (R) между пиками тиамина и примеси Е должно быть не менее 1,6. Время удерживания пика тиамина - около 30 мин.

Хроматографируют испытуемый раствор и раствор сравнения и определяют площади пиков.