Хроматография

Хроматогра́фия (от др.-греч. χρῶμα — цвет)  — динамический сорбционный метод разделения и анализа смесей веществ, а также изучения физико-химических свойств веществ. Основан на распределении веществ между двумя фазами — неподвижной (твердая фаза или жидкость, связанная на инертном носителе) и подвижной (газовая или жидкая фаза, элюент). Название метода связано с первыми экспериментами по хроматографии, в ходе которых разработчик метода Михаил Цвет разделял ярко окрашенные растительные пигменты. Метод хроматографии был впервые применён русским учёным-ботаником Михаилом Семеновичем Цветом в 1900 году. Он использовалколонку, заполненную карбонатом кальция, для разделения пигментов растительного происхождения.

По агрегатному состоянию  фаз

• Газовая хроматография
• Газо-жидкостная хроматография
• Газо-твёрдофазная хроматография
• Жидкостная хроматография
• Жидкостно-жидкостная хроматография
• Жидкостно-твёрдофазная хроматография
• Жидкостно-гелевая хроматография
• Сверхкритическая флюидная хроматография

По механизму взаимодействия

• Распределительная хроматография
• Ионообменная хроматография
• Адсорбционная хроматография
• Эксклюзионная хроматография
• Аффинная хроматография
• Осадочная хроматография
• Адсорбционно-комплексообразовательная хроматография

По цели проведения

• Аналитическая хроматография
• Препаративная хроматография
• Промышленная хроматография

По способу ввода пробы

Элюентная хроматография (проявительная, редк. элютивная)

Наиболее часто используемый вариант проведения аналитической хроматографии. Анализируемую смесь вводят в поток элюента в виде импульса . В колонке смесь разделяется на отдельные компоненты, между которыми находятся зоны подвижной фазы.

• Фронтальная хроматография

Смесь непрерывно подают в  колонку, при этом на выходе из колонки  только первый, наименее удерживаемый компонент можно выделить в чистом виде. Остальные зоны содержат 2 и  более компонентов. Родственный  метод — твердофазная экстракция (сорбционное концентрирование).

• Вытеснительная хроматография

В колонку после подачи разделяемой смеси вводят специальное  вещество-вытеснитель, которое удерживается сильнее любого из компонентов смеси. Образуются примыкающие друг к другу  зоны разделяемых веществ.

Отдельные виды хроматографии

• Высокоэффективная жидкостная хроматография
• Тонкослойная хроматография
• Газовая хроматография с программированием температуры
• Хроматермография
• Газовая хроматография с программированием расхода газ-носителя
• Газовая хроматография с программированием давления газ-носителя
• Хромабарография
• Хроматофокусирование

Тонкослойная  хроматография (ТСХ) является планарной разновидностью жидкостной хроматографии, в которой подвижная фаза (ПФ) движется в пористой среде слоя адсорбента.

Процесс подобен бумажной хроматографии, но его преимуществом является большая скорость анализа, более высокое качество разделения, и возможность выбора одной из неподвижных фаз, обладающей наиболее подходящими свойствами. В настоящий момент тонкослойная хроматография (ТСХ)является одним из основных методов анализа смесей органических веществ в научных лабораториях и полностью вытеснил бумажную хроматографию.

Самым простым вариантом планарной  хроматографии является бумажная хроматография, когда разделение производят с использованием специальной бумаги.

Для разделения используются пластины на основе оксида алюминия и силикагеля. Наиболее распространены пластины на основе силикагеля. Оксид алюминия и силикагель, как правило, размещается на стеклянной, металлической или пластиковой основе. В ряде случаев к сорбенту добавляется флуоресцентный индикатор синего или зелёного цвета.

Хроматограмма 10 эфирных масел, проявлена ванилином.

Также существуют NH₂-, CN-, ДИОЛ, и RP модифицированные сорбенты для анализа веществ не разделяющихся на силикагелях напрямую. Разделение, как правило, производится в специальных герметичных камерах для ТСХ.

Аналитическая ТСХ является качественным методом анализа веществ. Необходимо помнить, что интенсивность цвета пятен далеко не всегда является даже приблизительной количественной характеристикой. Такая оценка возможна при использовании универсальных проявителей, тогда детектирование производится визуально либо с помощьюденситометра.

Препаративная ТСХ является методом выделения вещества или группы близких веществ из смеси. В этом случае смесь наносится на старт в виде сплошной полосы. Далее отрезается край пластины (или закрывается вся остальная часть) и производится проявление. Часть пластины, соответствущая целевому веществу соскребается, вещество отделяется от адсорбента. Препаративную ТСХ следует использовать, если в лаборатории нет высокоэффективного жидкостного хроматографа (ВЭЖХ)